· PoliacrilamidoGel devas per akrilamida monomero, polimeriga komenca materialo, katalizilo kaj rajto de salo kaj bufraj miksaĵoj kune.
· Akrilamidokaj bis (n, n '- metilena duobla akrilamido) estas la monomera formo-gel-matrico.
· Amonio -persulfato Komencu adhesivan polimerigan procezon. La formulado de la gluo postulas 10% amonian persulfatan solvon preparitan en akvo. Plej multaj informoj indikis bezonon de aktiva uzo. Tamen, la solvo de 10% povas esti metita je 4 ℃ dum pluraj semajnoj sen signifa perdo de aktiveco. Ŝparu ĝis 10 ml kaj forĵetu kiam la gluo malsukcesas agregi.
Konsileto: la procento deAkrilamidoEn sekvenca gluo kaj proteina gluo ne samas. Se vi uzas Premade Acrylamide: BIS -solvo, certigu akiri la ĝustan botelon.
· Temita (n, n, n ', n'- tetrametila etilendiamino) estas katalizilo, en bruna botelo, metita en la fridujon. Aldonu ĝuste antaŭ ol verŝi gluon.
· Elektroforezo de poliacrilamido uzata vitro en elektroforezo devas esti lavita antaŭ kaj post ĉiu tempo. Post elektroforesis, lavu per mola peniko kaj tuko en varma sapo akvo, lavu kun distilita akvo kaj staru por sekiĝi.
· Humideco kaj polvo povas kaŭzi per kava polimero. Antaŭ elektroforesis, purigu la vitran teleron per vitra purigilo kaj viŝu ĝin per mola peniko. Lavu kun distilita akvo kaj sekiĝu ĝisfunde per papero. Enŝovi kun 70% etanolo antaŭ viŝi per papero helpas purigi kaj rapidigi sekigon. Aldonu specimenojn de akrilamido sinsekve: bis, akvo, bufra solvo, amonia persulfato. Skuu bone kaj verŝu tuj.
Ne necesas degasi poliacrilamidon antaŭ polimerigo. (Akrilamido kutimis esti metita en vakuon por forigi bobelojn ĉar oksigeno inhibicias polimerigon.)
Horizontaj Gluaj Punktaj Specimenaj Konsiletoj.
· Metu pecon da nigra papero en la malsupran skatolon, nigran fonon por fari iom da specimeno por vidi pli klare.
· Glua tanko plenigis bufron, ĝuste super la koloido.
· Se la rando havas lumon, ŝaltu la lumojn, lasu lumon brilas koloida. Desegnu la specimenon en la pipeton.
· Uzante aŭtomatan pipetan aparaton.
· En 10-200 MU 1 likva movanta punkto povas esti uzata en la plej multaj el la punktoj de la specimeno. Por tre malgrandaj specimenaj truoj (malpli ol 10μ1), la longa pipeta kapo uzata por sekvenca gluo estas pli konvena.
· Pipetado nur trempita en la specimeno, inhalante malrapide moviĝantan fluidon. La specimeno povas aperi glueca kun glicerino, kaj rapida pumpado povas tiri aerajn vezikojn en la pipetan kapon.
· Specimenoj post inhalado de pipeta kapo, movos fluidan kapon milde sur la randon de la tubo aŭ viŝanta paperon suĉas likvan kapon ekster la gutetoj. Atentu ne suĉi la specimenon.
Metu la specimenon en la specimenan truon
· Pipeta aparato por teni iom da premo, igu la specimenojn iomete movi superfluan likvan kapon.
· La pipeta kapo enmetita en la bufron, iomete pli altan ol la makulaj truoj, konservas pozitivan premon. La pinto de la pipeto povas esti enmetita en malgrandan truon.
· Malrapide kaj konstante la specimenoj. La pipeta beko estas metita super la punkta specimeno, kaj la specimeno sinkos en la truon. Lasu la specimenon enprofundiĝi por plenigi la specimenan truon anstataŭ puŝi.
· Post kiam la lasta guto de specimeno kun likva kapo, likvaĵo moviĝos al la dua kruro, malrapide levu la likvan movon, eliru el bufro
Kiel fari vertikalan specimenon de gluo?
· Vertikalaj gluaj punktaj specimenoj formitaj inter du pecoj de vitro. En tre maldika gluo, la pipeta kapo eĉ ne povas esti enmetita inter du vitraj platoj. Rigardu la glicerinon! Metu la pipetan kapon super la specimenan truon kaj la specimeno enprofundiĝos en la truon.
· Punkta specimeno Antaŭe, nepre metu la vertikalan punkton de polipropilena acila ĝel -specimeno estas enŝovita pura. Lavu la nepolimerigitan akrilamidon kaj la akvon, kiu povas aperi ĉe la fundo de la specimena truo. La akvo povas fari la specimenan truon signife pli malgranda. Uzu 25ml aŭ 50ml-seringon kaj 18-mezuritan nadlon. Verŝu en la elektroforesis bufron kaj zorge enŝovu la specimenan truon.
· Povas esti malfacile vidi la specimenan truon, sed samtempe la resto estas facila. Se estas troaj truoj, la ekzempla bufro povas esti testita per bromofenol -bluo.
Afiŝotempo: mar-31-2023